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隨著PD-1/PD-L1免疫治療的發(fā)展，PD-L1免疫組化檢測作為生物標志物也越來越受到重視，那不同的PD-1/PD-L1抗體藥物中，PD-L1免疫組化檢測使用的抗體和檢測平臺各不相同，在藥物研發(fā)中應如何選擇合適的PD-L1抗體呢？
PART 01
為什么要進行PD-L1檢測？
免疫治療已在多種腫瘤的治療中顯示出有效性和安全性，并被廣泛應用，已成為惡性腫瘤治療新的里程碑。然而，并不是所有患者都能從免疫治療中獲益，因此需要借助特定的生物標志物來篩選適宜人群和預測免疫治療的療效。PD-L1、微衛(wèi)星不穩(wěn)定、腫瘤突變負荷、腫瘤浸潤性淋巴細胞等生物標志物被證實具有一定的預測價值，其中PD-L1表達是目前應用最廣的免疫治療生物標志物。
隨著臨床實踐數(shù)據(jù)的積累，PD-1/PD-L1抑制劑在多種腫瘤中均被證實有效，現(xiàn)已用于包括肺癌、食管癌、胃癌、尿路上皮癌、肝癌、結直腸癌、乳腺癌、經典型霍奇金淋巴瘤及惡性黑色素細胞瘤等腫瘤的治療之中。一系列臨床研究結果證實腫瘤細胞或腫瘤相關免疫細胞的PD-L1表達水平與免疫治療療效及患者預后密切相關。PD-L1作為預測免疫治療藥物療效的標志物，對于免疫治療藥物的應用具有伴隨診斷（companion diagnostics）和補充診斷（complementary diagnostics）的價值。
PART 02
PD-L1檢測有哪些平臺方法？
免疫組織化學檢測PD-L1表達作為抗PD-1/PD-L1治療的預測性生物標志物，需遵循藥物-疾病-診斷分析（drug-disease-diagnosis，3D）原則，臨床試驗的設計是針對特定的疾病類型、選用了特定的免疫治療藥物以及特定的PD-L1免疫組織化學檢測方法，根據(jù)分層分析結果篩選出了獲益人群，同時PD-L1免疫組織化學判讀閾值是經過臨床實踐驗證的。所以，不同類型免疫治療藥物對應的PD-L1檢測試劑盒不盡相同，與療效相關的PD-L1陽性判讀閾值亦不盡相同。
PD?L1免疫組織化學抗體需與配套的檢測系統(tǒng)在對應的檢測平臺中進行：目前有多個PD-L1 免疫組織化學檢測抗體試劑盒，如22C3 pharmDx（Dako）、28-8 pharmDx （Dako）、SP142（Ventana）、SP263（Ventana）、73-10（Dako）及E1L3N（CST），在3個免疫組織化學平臺（Dako Autostainer Link 48、Ventana BenchMark、Leica Bond 免疫組織化學全自動染色系統(tǒng)）進行檢測。除了73-10外，其他5種抗體都已經在國內獲批。
表1 PD-L1免疫組織化學檢測試劑盒及配套的檢測系統(tǒng)、檢測平臺[1]
PART 03
22C3-K藥背后的伴隨抗體
帕博利珠單抗商品名為 Keytruda（可瑞達），由于通用名過于拗口，中文腫瘤界經常稱為K藥，即使在國內很多大型正式腫瘤會議，很多與會專家也將其稱為K藥，可見國內整個腫瘤學界對K藥的一致認可。
22C3在臨床開展最早的KEYNOTE-001研究是一項針對接受帕博利珠單抗治療的晚期NSCLC患者的I期臨床試驗， NSCLC擴展隊列研究總共入組495例患者，包括182例訓練集和313例驗證集人群。該研究采用22C3抗體檢測患者PD-L1的表達，在訓練集人群選擇不同的PD-L1 cut-off值及多種評分系統(tǒng)評估生物標志物，通過ROC曲線轉折點確定PD-L1 cut-off值為 TPS≥50%，之后在驗證集人群確認PD-L1 TPS≥50%人群療效更好且總生存期延長。隨后的KEYNOTE-010研究也采用PD-L1表達分層，研究顯示在伴有PD-L1陽性（TPS≥1%）的轉移性NSCLC中，帕博利珠單抗可以作為二線治療，OS有顯著改善。而KEYNOTE-042研究進一步將人群標準擴大至 PD-L1 TPS≥1%，結果提示與化療相比，帕博利珠單抗顯著降低死亡風險， NMPA于2019年批準其一線適應證，適用于PD-L1 TPS≥1%的EGFR及ALK陰性NSCLC患者。
后續(xù)多個臨床試驗中PD-L1表達檢測都使用了22C3抗體，并基于PD-L1表達分層分析的療效數(shù)據(jù)在不同適應癥中形成了臨床cut-off值（表2）。
表2 PD-L1 22C3抗體在不同瘤種中的臨床診斷cut-off值[1]
PART 04
28-8-O藥背后的伴隨抗體
納武利尤單抗商品名為歐狄沃，由于納武利尤單抗這個通用名過于拗口，大家經常口語化的以“歐狄沃”或“O藥”稱呼，與“K 藥”并稱為“OK雙雄”。
基于CheckMate -227的臨床試驗結果，2020年5月，美國FDA批準了PD-1抑制劑納武利尤單抗+ CTLA-4抑制劑伊匹木單抗(“O藥+Y藥”)聯(lián)合療法用于一線治療EGFR或ALK陰性且腫瘤表達PD-L1(≥1%)的轉移性非小細胞肺癌成人患者。
CheckMate-274研究顯示，在PD-L1表達腫瘤細胞≥1%的患者中，納武利尤單抗將疾病復發(fā)或死亡風險降低54%，基于此研究結果，2023年1月，納武利尤單抗獲批用于接受根治性切除術后伴有高復發(fā)風險尿路上皮癌（UC）患者的輔助治療，成為我國首個且唯一獲批用于UC輔助治療的 PD-1 抑制劑。
后續(xù)針對多個適應癥的臨床試驗中PD-L1表達檢測都使用了28-8抗體，并基于療效數(shù)據(jù)在不同適應癥中形成了臨床cut-off值（表3）。
表3 PD-L1 28-8抗體在不同瘤種中的臨床診斷cut-off值[1]
PART 05
SP263-應用廣泛的抗體
基于BGB-A317-204的II期研究，2020年4月10日，PD-1抑制劑替雷利珠單抗新適應癥獲NMPA批準，用于治療接受含鉑化療失敗包括新輔助或輔助化療12個月內進展的局部晚期或轉移性PD-L1高表達的尿路上皮癌（UC）患者，SP263為替雷利珠單抗的伴隨診斷檢測試劑。
根據(jù)PACIFIC的研究結果，在總生存期的亞組分析中，除了PD-L1表達陰性（TC＜1%）的患者，其他亞組都更傾向于使用度伐利尤單抗進行治療。
下表中列出了部分PD-L1表達檢測使用SP263抗體的臨床試驗，及基于PD-L1表達分層分析的療效數(shù)據(jù)形成的臨床cut-off值（表4）。
表4 PD-L1 SP263抗體在不同瘤種中的臨床診斷cut-off值[1]
PART 06
SP142-阿替利珠單抗背后的抗體
阿替利珠單抗（泰圣奇）在臨床試驗設計時，為了使獲益人群更廣，療效不受檢測抗體的限制，分別使用了SP142、22C3及SP263抗體進行IHC檢測，檢測的患者分別有554例、534例及546例，結果提示不論是SP142、22C3或SP263抗體檢測，都能觀察到PD-L1高表達患者從阿替利珠單抗治療中實現(xiàn)穩(wěn)定的OS獲益。2021年4月29日，PD-L1抑制劑阿替利珠單抗（泰圣奇）獲得NMPA批準用于PD-L1高表達（TC≥50％或IC≥10％）晚期非小細胞肺癌（NSCLC）患者的一線治療。
基于IMpower132的研究結果，2021年6月22日， NMPA批準免疫藥物PD-L1抗體阿替利珠單抗新適應癥，此次獲批的適應癥為：聯(lián)合培美曲塞和鉑類化療用于無 EGFR 突變和無ALK突變的轉移性非鱗非小細胞肺癌患者的一線治療。
下表中列出了部分PD-L1表達檢測使用SP142抗體的臨床試驗，及基于PD-L1表達分層分析的療效數(shù)據(jù)形成的臨床cut-off值（表5）。
表5 PD-L1 SP142抗體在不同瘤種中的臨床診斷cut-off值[1]
PART 07
E1L3N-最新國產伴隨抗體
E1L3N抗體為最新獲NMPA批準的國產PD-L1表達檢測試劑，用于非小細胞肺癌患者組織切片中PD-L1蛋白的表達檢測，伴隨的藥物為帕博利珠單抗。
總結
此篇內容主要介紹了PD-L1免疫組化檢測5種常見抗體的應用，可以看出同一適應癥不同藥物對應的PD-L1檢測試劑盒不同，與療效相關的PD-L1陽性判讀閾值亦不相同，那么不同抗體間檢測的結果是否可以互用，陽性判讀閾值是否可以互用？下篇將針對這些問題，詳細介紹不同抗體互用性比較結果及熙寧生物|精翰生物PD-L1檢測服務，敬請期待。
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